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O bloqueio dos sítios inespecíficos é uma etapa importante e deve ser realizada antes da incubação do anticorpo primário.
Sem considerar erros de pipetagem, a recomendação do fabricante para concentração de trabalho inicial de um anticorpo primário é 1:25, e, nesse caso, supondo-se que se tenha 50 lâminas, com corte tecidual médio, é preciso utilizar 2400 microlitros do diluente e 100 microlitros do anticorpo primário concentrado, ou seja,2500 microlitros de volume final.
A reação imuno-histoquímica não pode ser automatizada.
Quando se recebe um anticorpo no laboratório, que foi comprado de determinado fabricante, ele deve vir devidamente acondicionado com gelo seco ou gelo eutético.
O EDTA (ethylenediamine tetra-acetic acid ) é um ácido que tem sido utilizado, com frequência, para descalcificar tecidos mineralizados que passarão por métodos imuno-histoquímicos.