Questões de Concurso

A técnica de imunolocalização de Tokuyasu é amplamente utilizada em estudos de microscopia eletrônica de transmissão por permitir a visualização precisa de antígenos (ou proteínas de interesse) em tecidos e células.
Assinale a alternativa que descreve corretamente as etapas do protocolo dessa técnica.

(a)

As amostras são fixadas com altas concentrações de glutaraldeído, incluídas em resina epóxi e marcadas com anticorpos fluorescentes.

(b)

As amostras são incluídas em resina acrílica e a marcação antigênica ocorre em secções semifinas, contrastadas com tetróxido de ósmio e chumbo, utilizando anticorpos conjugados com ouro coloidal.

(c)

As amostras são fixadas, embebidas em sacarose, congeladas e cortadas a frio antes da marcação com anticorpos conjugados com ouro coloidal.

(d)

As amostras são cortadas no vibratomo, à temperatura ambiente, embutidas em resina epóxi e marcadas com anticorpos.

(e)

A amostra é congelada a -20 ºC, cortada no vibratomo, e os cortes são marcados com marcadores intracelulares fluorescentes.