Questões de Concurso

O teste RT-qPCR é considerado o padrão-ouro no diagnóstico de infecção pelo SARS-COV-2. Está baseado em biologia molecular e funciona procurando fragmento do vírus no hospedeiro. Por isso, ele identifica o novo coronavírus no início da infecção, ou seja, no período em que ainda está agindo no organismo. Essa técnica é considerada o padrão-ouro devido à sua alta especificidade e sensibilidade. Isso significa que ela dificilmente apresenta falsos negativos. Assinale a alternativa que representa melhor o fundamento da técnica.

(a)

Nesta metodologia, que se baseia na detecção do DNA genômico, a reação ocorre em 3 etapas, iniciando pela desnaturação, anelamento dos iniciadores e então a extensão da região específica do agente infeccioso pela ação da Taq DNA polimerase.

(b)

Nesta metodologia, a enzima transcriptase reversa é usada para transformar o cDNA em DNA, que é fracionado em microgotas onde ocorrem as reações de amplificação, o que aumenta significativamente a sensibilidade e permite a detecção de eventos raros, como a presença do vírus, minimizando os efeitos da concorrência entre os alvos, superando as dificuldades inerentes à amplificação de sequências raras e permite uma quantificação absoluta, sensível e precisa.

(c)

Essa metodologia dispensa a utilização de géis de eletroforese, pois o resultado é visualizado imediatamente. Isto é possível pela adição de sondas fluorescentes às reações. A amplificação do DNA-alvo pode ser acompanhada durante a reação de amplificação do DNA viral. O nível de fluorescência cresce proporcionalmente à carga viral.

(d)

Esse tipo de reação utiliza a enzima transcriptase reversa para transformar o RNA em cDNA, que então é amplificado e a reação monitorada pela emissão de fluorescência em cada uma das amostras.

(e)

Esse tipo de reação utiliza a enzima transcriptase reversa, que é capaz de amplificar o RNA viral e a reação monitorada pela emissão de fluorescência em cada uma das amostras.