Questões de Concurso

Um pesquisador deseja purificar uma proteína recombinante presente em um lisado celular bruto. A proteína de interesse possui massa molecular de 60 kDa, ponto isoelétrico (pI) de 6,5 e foi expressa com uma cauda de histidina para facilitar a purificação. O objetivo é obter uma amostra altamente purificada, adequada para análise estrutural e, posteriormente, armazená-la a longo prazo.
Assinale a alternativa que apresenta a sequência adequada para a purificação e armazenamento da proteína.

(a)

Centrifugação e recolher o sobrenadante; cromatografia de exclusão por tamanho; cromatografia de troca iônica; cromatografia de afinidade; armazenamento a 4 o C.

(b)

Centrifugação e recolher o precipitado; cromatografia de afinidade; cromatografia de exclusão por tamanho; armazenamento em tampão fisiológico e glicerol a –20 o C

(c)

Centrifugação e recolher o sobrenadante; precipitação com sulfato de amônio; diálise; armazenamento a –80 oC.

(d)

Centrifugação e recolher o precipitado; cromatografia de troca iônica; cromatografia de exclusão por tamanho; armazenamento em tampão fisiológico e glicerol a –20 o C.

(e)

Centrifugação e recolher o sobrenadante; cromatografia de afinidade; cromatografia de troca iônica; cromatografia de exclusão por tamanho; adição de glicerol e armazenamento a –80 o C.