Questões de Concurso

Os métodos usados para testar a função imune em humanos são mais limitados do que aqueles usados em animais experimentais, porém muitos testes diferentes estão disponíveis. Eles classificam-se em diferentes grupos, dependendo do motivo pelo qual o paciente está sendo avaliado. Com base na avaliação da resposta imune e competência imunológica em humanos, considere as afirmativas a seguir.

I. Para avaliar a imunidade humoral contra vírus, a produção de anticorpos é, em geral, medida pela capacidade do soro em neutralizar o potencial infeccioso do vírus vivo em células em cultura. Além de fornecer informações sobre a imunidade protetora, a presença de um anticorpo contra um patógeno em particular indica que o paciente foi exposto a ele, fazendo com que esses testes apresentem importância crucial na epidemiologia.

II. A imunidade mediada por células T é tecnicamente mais fácil de avaliar do que a imunidade humoral. Isso, principalmente, porque as células T secretam um produto que se liga a antígenos e há um ensaio de ligação simples para suas respostas antígeno-específicas.

III. Testes muito semelhantes são usados na investigação da alergia, em que os alérgenos são usados como anticorpos em testes para antígenos IgE específicos por ELISA ou RIA, os quais podem ser usados para confirmar os resultados de testes cutâneos.

Assinale:

Considerando as técnicas de imunoprecipitação e imunoblote (Western blotting), analise as afirmativas a seguir.

I. O imunoblote, como a imunoprecipitação, é usado para identificação da presença de uma determinada proteína em um lisado celular, mas evita o problema de marcar grandes quantidades de células com radioisótopos.

II. Todas as proteínas de uma célula podem ser marcadas metabolicamente acrescentando aminoácidos radioativos no meio de cultura, que serão incorporados às proteínas celulares. Outra opção consiste na marcação apenas de proteínas de superfície celular por radioiodinação sob condições que impedem o iodo de cruzar a membrana plasmática e marcar proteínas intracelulares.

III. As células não-marcadas são colocadas em solução de NaOH 2M para solubilizar todas as proteínas celulares, e o lisado é submetido a SDS-PAGE para separar as proteínas. As proteínas, separadas por tamanho, são, então, transferidas do gel para um suporte estável, tal como agar-agar. Proteínas específicas podem ser detectadas por anticorpos capazes de reagir com proteínas solubilizadas por SDS, sendo os anticorpos ligados revelados com antígenos anti-imunoglobulina marcados com radioisótopos ou com uma célula que carrega o gene do anticorpo marcado. Este processo é conhecido como imunoblote (immunoblotting ou Western blotting).

Assinale: